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            优多菌的耐热、耐菌与抑菌试验

            2012.09.05

                    优多菌是枯草芽孢杆菌经发酵、纯化、干燥、载体稀释而制成的新型高效益生芽孢杆菌预混剂,而枯草芽孢杆菌是经农业部认可的动物肠道有益微生物;金霉素是一种四环素类抗生素,能作用于革兰氏阳性菌以及敏感革兰氏阴性菌所致浅表眼部感染的治疗,也可用于沙眼衣原体所致沙眼的治疗;金黄色葡萄球菌是机体内隶属于葡萄球菌属的一种重要病原菌,它是一种典型的革兰氏阳性菌,能引起多种感染。本试验主要以温度、金霉素、金黄色葡萄球菌为对象,研究优多菌的耐温能力、对抗生素的抵抗能力以及对病原菌的抑制作用,为确定优多菌在养殖业中的广泛应用提供理论和实验依据。
            1、试验材料与方法
            1.1  耐温试验
                   用LB培养基来培养菌种,分别取7只相同的试管,每管加入10ml水,将各个试管灭菌处理后,分别接入1ml菌种,编号,分别将其在50、60、70、80、90、100 ℃的水浴中保持10min,室温的为对照组,10min后迅速冷却到室温,然后分别对这7只试管用平板计数法进行计数。
            1.2  耐菌试验
                   将一定量的金霉素粉末溶于无菌水中,按照饲料中添加量的不同稀释成不同的比例,让其分别与无菌培养基进行混合,并且接种,在培养的过程中对其进行观察。
                                                                                               表1 :金霉素在饲料中的添加量
            编号
            1
            2
            3
            4
            5
            6
            7
            浓度g/t
            0
            5
            20
            30
            50
            70
            100
                   液体好氧摇床培养,培养时间为36小时,温度为37℃,180转/min,培养好以后,在镜下对其进行观察。
            1.3  抑菌试验
                   本试验采用滤纸法进行优多菌的抑菌实验,透明圈的大小表示优多菌对金黄色葡萄球菌抑制作用的强弱。
            2、试验结果与分析
            2.1 耐温试验
                                                                                               表2:平板计数的结果:
            温度(℃)
            50
            60
            70
            80
            90
            100
            对照
            测得结果(cfu)
            2.0*106
            1.94*106
            1.81*106
            1.83*106
            1.76*106
            1.32*105
            2.4*106
                     由上表可以看出,与室温相比,优多菌中枯草芽孢杆菌在50-90℃的温度范围内,几乎没有损失;长时间(36小时)在100℃的温度下,枯草芽孢杆菌数量有一定的下降,但仍有较高的活力。
            2.2 耐菌试验
                   在镜下观察后,可以看出:添加金霉素的培养基培养的菌种数量与空白组相比虽然少一些,但是菌体明显比对照组的菌体粗壮。菌种生长随着金霉素浓度的增加而愈加健壮;芽孢形成速度与空白组相比要缓慢一些。
            2.3 抑菌试验
            结果如下图所示:
                    由图片可以看出,接种优多菌的滤纸片周围形成了一个透明圈,透明圈越大,则表明金黄色葡萄球菌生长越受到抑制。结论,优多菌抑制了金黄色葡萄球菌的生长。
            3、结论
            3.1  优多菌长时间在100℃的温度下仍有较高的活性,因此挤压制粒过程中的瞬间高温对优多菌的影响不是很大,可以保证其在制粒后的存活。
            3.2  金霉素对优多菌没有抑制作用,相反对优多菌有一定的促进作用,因此,动物在服用金霉素期间不会影响芽孢杆菌的生长,在机体内它们可以协同作用。
            3.3  优多菌对金黄色葡萄球菌有抑制作用,控制了金黄色葡萄球菌在动物体内的生长,减少了病原菌在动物体内的繁殖。